DAB顯色試劑盒(20×)說明書
DAB Kit(20×)
DAB顯色試劑盒(20×)
目錄號(hào):K0125
保存條件:2-8℃保存。
組分說明
Cat. No. K0125 K0125A
Kit Size 20 ml 60 ml
DAB-試劑 A(20×) 1 ml 3 ml
DAB-試劑 B(1×) 20 ml 60 ml
產(chǎn)品簡介
DAB(3,3′N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride)是辣根過氧化物酶(HRP)
的常用底物,在辣根過氧化物酶的催化下,DAB會(huì)產(chǎn)生不溶于水和乙醇的棕色沉淀。
該試劑盒適用于HRP系統(tǒng)的的免疫組化中的組織切片、細(xì)胞爬片以及Western Blot中
PVDF膜、NC膜等的染色。辣根過氧化物酶可以催化底物DAB在目的蛋白所在的位置
轉(zhuǎn)變?yōu)楹稚幕衔铮筛鶕?jù)顏色反應(yīng)來確定目的蛋白的位置及表達(dá)情況。
注意事項(xiàng)
1.工作液現(xiàn)配現(xiàn)用,配制好的工作液2-8°C避光1小時(shí)內(nèi)有效。
2.工作液用量必需充足,保證*覆蓋組織片或印跡膜。
3.顯色后的組織切片或細(xì)胞爬片可用蘇木精或甲基綠復(fù)染。
4.對于組織切片,以每張切片用50 µl顯色工作液計(jì)算,1 ml 20×DAB為400張切片的用量,3 ml為1200張切片的用量。
5.為獲得Z佳實(shí)驗(yàn)結(jié)果,請務(wù)必優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。
6.顯色后若背景太深,可以考慮延長封閉時(shí)間,避免非特異性染色,或者縮短 DAB的
顯色時(shí)間;顯色后若顯色太弱或沒有顯色,可以考慮增加一抗或二抗的濃度,或者
適當(dāng)延長顯色時(shí)間。
7.DAB為可疑致癌物,使用時(shí)請采取必要的防護(hù)措施。
8.本產(chǎn)品僅用于科研,不能用于人體反應(yīng)或人體治療。
使用方法
1.DAB顯色工作液配制:根據(jù)需要量,將試劑A和試劑B以1:19的體積比混勻后即為
DAB顯色工作液。也可選擇每毫升試劑B中滴加1滴(約50 µl)試劑A,混勻即可。
2.顯色:1)印跡膜顯色:將配制好的工作液滴加在印跡膜上(或?qū)⒂≯E膜傾入到DAB
工作液中)即可顯色。顯色時(shí)間一般為 1-5分鐘。顯色完畢后,將膜浸入水中,終
止反應(yīng)。
2)組織切片或細(xì)胞爬片顯色:加適量的 DAB顯色工作液于需要顯色的組織切片或
細(xì)胞爬片上即可顯色,顯色時(shí)間一般為 1-5分鐘。顯微鏡下觀察控制顯色時(shí)間,當(dāng)
達(dá)到最佳顯色效果后,自來水沖洗終止顯色。顯色后的切片經(jīng)復(fù)染、脫水透明,封
片后可長期保存。
實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):
實(shí)驗(yàn)室代做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
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| 染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
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