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植物蛋白抽提試劑盒說明書
點擊次數(shù):844 更新時間:2020-08-05

                                                                                                                    

植物蛋白抽提試劑盒說明書

Plant Protein Extraction Kit

 

 

Cat. No.   K0885   

保存:蛋白酶抑制劑混合物:-20℃

    其它組分:室溫  

 

組分說明

 

Catalog no.                K0885B       K0885C

Kit Size                      25 次         100  次

Plant Protein Extraction Reagent      25 ml         100 ml

蛋白酶抑制劑混合物               250  μl      1 ml

產(chǎn)品簡介

    本植物蛋白抽提試劑盒可從新鮮、冰凍或干燥植物組織中提取可溶性植物蛋白。適用于多種植物及植物的不同部位(如根、莖、葉、花、種子等)蛋白提取,高效提取植物蛋白,比傳統(tǒng)的方法提取蛋白產(chǎn)量大、活性高、速度快。所提蛋白可直接進行蛋白電泳分析、免疫沉淀、Western  Blot、蛋白活性測定及蛋白純化等實驗。所提蛋白可用 BCA蛋白定量試劑盒(#K0014)進行濃度的測定。

注意事項

 1. 本品含有1mM EDTA。

 2. 本產(chǎn)品適用于提取植物葉子、根等組織蛋白。

 3. 為防止蛋白降解,所有的操作盡量在冰上進行。

 4. 使用本產(chǎn)品提取后蛋白,可采用BCA 法進行蛋白定量。

 5. 為了獲得實驗*佳效果,請根據(jù)實驗調(diào)整*使用量。

操作步驟  

 1.  請在蛋白抽提前取出實驗所需蛋白抽提試劑進行預(yù)冷,  按照1:99比例加入蛋白酶抑制劑混合物(例如990μl抽提試劑中加入10  μl蛋白酶抑制劑混合物),使蛋白酶抑制劑混合物在抽提試劑中成1×工作液。

注意:在進行蛋白抽提前2-3分鐘內(nèi)加入蛋白酶抑制劑混合物。

 2.  稱量試驗植物組織的重量。按照組織:抽提試劑=1:5(g/ml)的比例加入蛋白抽提試劑并勻漿處理(裂解液的使用量依據(jù)植物不同部位的而定)。若需要濃縮的蛋白提取物,可適當減少植物蛋白抽提試劑使用量。

     注意:勻漿前將大塊的植物組織剪成小塊,機械勻漿器可選用30,000rpm,勻漿10s,間歇10s,反復(fù)三次進行裂解,根據(jù)組織樣本不同選用適合的勻漿方式。

 3.  勻漿后冰上孵育20分鐘(冰上放置時間可適當延長至30分鐘)。

 4.  4℃  12,000 rpm,離心20分鐘。

 5.  收集上清中的可溶性蛋白,進行下一步的純化或下游分析。

 

 

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